CHAPITRE IV

LES REACTIONS ANTIGENE-ANTICORPS

 

I- INTRODUCTION

 

II- PRINCIPES GENERAUX DES TECHNIQUES

II-1. Les réactions primaires
II-1.1./ Marquages des Ac ou des Ag
II-1.1.1./ Marquage par un isotope radioactif (RA*)
-a- Marquage in vivo
-b- Marquage in vitro
II-1.1.2./ Marquage par une enzyme
II-1.1.2.1/ Les applications de l'immuno-enzymologie
II-1.1.2.2/ Méthodes de couplage
-a-
couplage par la glutaraldéhyde
-b- Couplage par la dimaléimide
-c- Couplage par le toluène 2-4-di-isocyanate
II-1.1.2.3/ Enzymes utilisées comme marqueurs et leur substrat
-a-
Peroxydase du Raifort
-b- Phosphatase alcaline d'Escherichia coli
-c- Glucose oxydase d'Aspergillus niger
II-1.1.3./ Marquage par un fluorochrome
II-1.1.3.1./ Fluorescences et fluorochromes
II-1.1.3.2./
Méthode de marquage
II-1.1.4./ Autres marqueurs utilisés en immunologie ou dans les dosages
immunologiques
II-1.1.4.1./
Marqueurs utilisés dans les immunodosages
II-1.1.4.2./ Marqueurs utilisés en immunocytologie
II-1.2./ Méthodes faisant appel à des Ac ou à des Ag marqués
II-1.2.1./ Immunodosages des Ag ou des Ac par des techniques en phase hétérogène
II-1.2.1.1./ Tests compétitifs
II-1.2.1.2./
Tests non compétitifs
L'immunoblot
-a-
Electrophorèse monodimensionnelle en présence de dodécyl sulfate de sodium (SDS)
-b- Electrotransfert
-c- Immunoblot
L'immunodot

La radio-immunoprécipitation
II-1.2.2/ Méthodes immunohistologiques ou immunocytologiques

II-2. Les réactions secondaires
II-2.1./ Immunodosages des Ag ou des Ac par des techniques en phase homogène

II-2.1.1. Les radicaux avec électron impair
II-2.1.2. Les enzymes (le lysozyme, la G6PD, la malate déshydrogénase...).
II-2.1.3. La réaction d'extinction de la fluorescence (fluorescence quenching)
II-2.2./ Dosage immunologique en couche mince (thin layer immunoassay)

II-2.3./ Immunoprécipitation
II-2.3.1./ Immunoprécipitation en milieu liquide - Néphélométrie ou turbidimétrie

II-2.3.2./ Immunoprécipitation en milieu gélifié
II-2.3.2.1./
Technique historique d'immunodiffusion en tube de Oudin
II-2.3.2.2./
Immunodiffusion (ou double diffusion) en plaque d'Ouchterlony
II-2.3.2.3./ Immunodiffusion radiale simple de Mancini
II-2.3.2.4./
Immunoélectrophorèse
-a- Immunoélectrophorèse type
-b- Variantes de l'immunoélectrophorèse
II-2.3.2.5./ Contre immunoélectrophorèse ou électrocinérèse.
II-2.4./ Agglutination et hémagglutination
II-2.5./ Réactions de neutralisation
II-2.6./ Réaction de fixation du C par les Ac ayant réagi avec les Ag correspondants
II-2.6.1
./
Réaction faisant intervenir toutes les fractions du C (de C1 à C9)
II-2.6.1.1./
Réaction de fixation du C hémolytique
II-2.6.1.2./
Réaction de lyse des liposomes
II-2.6.1.3./ Réaction de cytolyse par le C
II-2.6.2./
Réactions faisant intervenir certaines fractions du C
II-2.6.2.1
./ Immunoadhérence (hématies et plaquettes de primates) et opsonisation (phagocytes)
II-2.6.2.2./ Réaction de fixation du C1q marqué

III- SENSIBILITE COMPAREE DES DIFFERENTES METHODES